RNAi载体构建及筛 RNAi载体构建及筛选
2019-4-2 14:04:20发布35次查看ip:发布人:
实验原理
早期的shrna载体多采用rna聚合酶iii型启动子介导shrna的表达，rna聚合酶iii型启动子如鼠源的u6启动子和人源的h1启动子可以在哺乳动物细胞中表达小分子rna。随着mirna干扰机制的深入研究，发展出第二代shrna载体，即采用rna聚合酶ii型启动子cmv表达含侧翼序列的mirna模拟物。该载体模拟mirna的加工，表达出来的shrna进入risc沉默复合物的效率要比rna聚合酶iii型启动子表达的shrna高数十倍，抑制效率更好，且可以和egfp协同表达，方便观察转染效率。
实验流程
北京瑞金特生物科技有限公司
赵老师
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