酶标免疫测定程序 将所有所需试剂从冷藏环境中取出，待其完全回升至室温后方可使用，根据体积大小不同取出回温的时间从1小时~2小时。注意每种液体试剂使用前均须摇匀。  按标准品和样品双孔平行的数量使用微孔。  加标准品/样品、抗体：加标准品/样品50µl 到对应的微孔中，加入氟苯尼考抗体50µl/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置37℃避光环境中反应20min。  洗板：小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，加入洗涤工作液300 µl/孔，每次静置20s，甩去孔内液体，重复洗涤3次，最后一次用吸水纸拍干（拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破）。 加酶标物：加入氟苯尼考酶标物100 µl/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置37℃避光孵育20 min。 甩干孔内液体，重复洗板3次，最后一次用吸水纸拍干。 显色：加入底物液a液50 µl/孔，再加底物液b液50 µl/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置37℃避光环境中反应10min。 测定：加入终止液50µl/孔，用酶标仪立即  测定450/630nm处的吸光度值。   注意事项
① 根据体积大小不同取出回温的时间从1小时~3小时，体积15毫升以上的优先从冷藏环境取出 回温。
②  洗板拍干后应立即进行下一步操作。
③ 反应终止液为2m硫酸，避免接触皮肤。
④不使用过了有效期的试剂盒，不交换使用不同批号的试剂。
⑤ 0标准的吸光度（450/630nm）值小于0.5（a450nm<0.5）时，表示试剂可能变质。
⑥ 在加入底物液a液和底物液b液后，一般显色    时间为10min即可。若颜色较浅，可延长反应时间到15-20min，反之则减短反应时间。
⑦ 底物液b液长期使用变为浅蓝色时，请放心使用，不影响检测结果。